品名 | 規格 | 包裝 | 單價 | 貨期 |
Lowry法蛋白濃度測定試劑盒 | 1000微孔(100T) | 462元 | 現貨 |
Folin-酚試劑法包括兩步反應:第一步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將Folin試劑還原,產生深藍色,顏色深淺與蛋白質含量成正比。定量范圍為5~100μg/ml蛋白質。Folin試劑顯色反應由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強度稍有不同。
操作說明:
1.根據需要量,取適量Folin酚甲試劑A和B按50:1混合,混合后有效期為24小時,過期失效。
2.根據需要量,取適量BSA標準品用PBS稀釋稀釋10倍至濃度0.5mg/ml。
若采用酶標儀法(96孔)
3.將標準品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS補足到20ul。
4.將樣品作適當稀釋(最好多做幾個梯度),加20ul到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點誤差比較大,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
5.將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200ul,輕輕震動,混勻,室溫放置10分鐘。
6.各孔加入20微升Folin酚乙試劑,迅速混勻,37℃放置30分鐘。用酶標儀測定A650計算蛋白濃度。
若采用分光光度計法(接上述步驟2)
3.取八支(或者更多)5ml離心管,標號,按下表加入試劑。
4.混勻,37℃放置30分鐘。分光光度計測定A650計算蛋白濃度。
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